液相色譜儀(HPLC)作為現(xiàn)代分析化學(xué)中的重要設(shè)備，廣泛應(yīng)用于藥物分析、食品安全、環(huán)境監(jiān)測、生物化學(xué)等多個(gè)領(lǐng)域。為了確保儀器運(yùn)行穩(wěn)定、數(shù)據(jù)準(zhǔn)確可靠，在每次使用前做好充分的準(zhǔn)備工作至關(guān)重要。那么，
液相色譜儀在使用前需要做哪些準(zhǔn)備呢？
首先，操作人員應(yīng)熟悉儀器的操作規(guī)程和相關(guān)實(shí)驗(yàn)方法，了解所用色譜柱的類型、流動(dòng)相的配比以及檢測器的參數(shù)設(shè)置。同時(shí)，檢查實(shí)驗(yàn)所需的試劑、溶劑是否齊全，并確保其純度符合要求，避免雜質(zhì)干擾分析結(jié)果。
其次，應(yīng)對(duì)液相色譜系統(tǒng)進(jìn)行基本檢查。包括：確認(rèn)泵的壓力傳感器、流路連接無泄漏；檢查脫氣機(jī)是否正常工作，以防止氣泡進(jìn)入系統(tǒng)影響泵的穩(wěn)定性；查看色譜柱是否安裝正確，是否有堵塞或漏液現(xiàn)象；確認(rèn)檢測器燈源是否點(diǎn)亮，基線是否穩(wěn)定等。
接下來是流動(dòng)相的準(zhǔn)備。流動(dòng)相應(yīng)使用HPLC級(jí)溶劑，并經(jīng)過0.45μm或更細(xì)孔徑的濾膜過濾，去除微粒雜質(zhì)。同時(shí)，流動(dòng)相應(yīng)進(jìn)行超聲脫氣或在線脫氣處理，以減少氣泡對(duì)流速和檢測信號(hào)的影響。不同實(shí)驗(yàn)所需的流動(dòng)相比例應(yīng)提前配置好，并根據(jù)需要調(diào)節(jié)pH值或添加緩沖鹽。
樣品的預(yù)處理同樣不可忽視。樣品溶液應(yīng)經(jīng)過適當(dāng)?shù)倪^濾(如使用一次性濾頭)和稀釋，避免顆粒物進(jìn)入色譜柱造成堵塞或損傷固定相。對(duì)于復(fù)雜基質(zhì)樣品，還應(yīng)考慮采用固相萃取(SPE)等凈化手段，以減少對(duì)色譜系統(tǒng)的污染。
此外，開機(jī)前應(yīng)開啟排液閥進(jìn)行“purge”操作，排出泵內(nèi)可能存在的氣泡，確保系統(tǒng)壓力穩(wěn)定。然后關(guān)閉排液閥，設(shè)定合適的流速和檢測波長，待基線穩(wěn)定后再開始進(jìn)樣分析。
而且，實(shí)驗(yàn)室環(huán)境也需符合要求，保持恒定的溫度和濕度，避免震動(dòng)和灰塵影響儀器性能。同時(shí)，應(yīng)建立完整的使用記錄和維護(hù)計(jì)劃，定期清洗流路、更換密封圈等易損件，確保儀器長期處于良好狀態(tài)。
總之，液相色譜儀在使用前的準(zhǔn)備工作雖然繁瑣，但每一步都直接影響到分析結(jié)果的準(zhǔn)確性與重復(fù)性。只有認(rèn)真細(xì)致地完成各項(xiàng)準(zhǔn)備，才能充分發(fā)揮儀器的性能，為科研和生產(chǎn)提供可靠的數(shù)據(jù)支持。
